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【中國儀器網(wǎng) 使用手冊】體視熒光顯微鏡是顯微鏡的一種，這種顯微鏡以紫外線為光源，通過觀察被測物的熒光圖像對物體作出判斷。目前，熒光體視顯微鏡是活體動物體內(nèi)熒光成像技術(shù)的核心技術(shù)，被用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。體視熒光顯微鏡是生物、工業(yè)檢測等領(lǐng)域進(jìn)行定性和定量研究的可靠工具之一。
體視熒光顯微鏡的使用方法：
使用前，需檢查實驗室工作環(huán)境，確保環(huán)境符合儀器說明中的使用環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)后依照規(guī)范操作進(jìn)行操作。
1.將材料片放在載物臺上，開啟熒光顯微鏡穩(wěn)壓器.然后按下啟動組點燃紫外燈，需要注意的是，點燃紫外燈后十五分鐘內(nèi)不能關(guān)閉，關(guān)閉紫外燈后三分鐘內(nèi)不得再啟動。
2. 將激發(fā)濾光片轉(zhuǎn)至v，分色片調(diào)到v，選用495或475nm阻擋濾光片；選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。
3. 在玻片上加無熒光油，依次用“40x”“100 x”調(diào)焦鏡檢，呈現(xiàn)熒光。
4. 因熒光物質(zhì)受紫外光照射時隨時間的增長熒光逐漸變?nèi)?，因此鏡檢時應(yīng)經(jīng)常變換視野。
注意：同樣可以使用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料，用低倍鏡觀察時不加無熒光油。
注意事項：
(1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。
(2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后，眼睛*適應(yīng)暗室，再開始觀察標(biāo)本。
(3)防止紫外線對眼睛的損害，在調(diào)整光源時應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。
(4)檢查時間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱;所以，多不得超過2～3h。
(5)熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié) 省時間，保護(hù)光源。天熱時，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時，須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點燃光源。
(6)標(biāo)本染色后立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發(fā)。
(7)熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn)： “-”—無或可見微弱熒光。“+”—僅能見明確可見的熒光。“++”—可見有明亮
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