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光場顯微鏡實(shí)現(xiàn)神經(jīng)活動(dòng)3D成像
近日美國麻省理工學(xué)院和奧地利維也納大學(xué)的研究學(xué)者創(chuàng)造了一個(gè)成像系統(tǒng),能夠揭示活體生物大腦里的神經(jīng)活動(dòng)。這項(xiàng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)生整個(gè)大腦的3D動(dòng)畫,它將幫助科學(xué)家研究神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)是如何處理感官信息從而產(chǎn)生行為的。
光場顯微鏡下的神經(jīng)活動(dòng)成像
研究小組利用新的系統(tǒng)同時(shí)對秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans )的每一個(gè)神經(jīng)元活動(dòng)以及斑馬魚幼蟲的整個(gè)大腦進(jìn)行成像,從而提供了神經(jīng)元系統(tǒng)活動(dòng)更加完整的圖片。
“觀察大腦里一個(gè)神經(jīng)元的活動(dòng)并不能為你展示大腦是如何處理信息的,你需要知道上一個(gè)神經(jīng)元的活動(dòng)。而為了理解一個(gè)特定神經(jīng)元活動(dòng)的意義,你又必須知道下一個(gè)神經(jīng)元的活動(dòng)。”美國麻省理工學(xué)院大腦、認(rèn)知科學(xué)和生物工程學(xué)副教授埃德·博伊登(Ed Boyden)這樣說道。簡言之,如果你想要了解感官信息是如何集合并形成行為的,你必須了解整個(gè)大腦的活動(dòng)。
而的這個(gè)方法將幫助神經(jīng)科學(xué)家了解更多有關(guān)大腦紊亂的生物學(xué)基礎(chǔ)。“我們并不知道大腦紊亂所涉及的特定細(xì)胞集。” 博伊登說道。“調(diào)查整個(gè)神經(jīng)系統(tǒng)的活動(dòng)或可以幫助確定大腦紊亂所涉及的細(xì)胞或者網(wǎng)絡(luò),從而產(chǎn)生治療方法的新觀點(diǎn)。”博伊登帶領(lǐng)的研究小組與維也納大學(xué)的研究人員合作提出了一種描繪大腦的新方法。
高速3D成像
神經(jīng)元利用名為放電特性(Action Potentials, APs)的電子脈沖可以編碼信息——感官數(shù)據(jù)、情緒狀態(tài)和思想,這種電子脈沖會(huì)刺激鈣離子流入每一個(gè)細(xì)胞。通過注入與鈣結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)光的熒光蛋白,科學(xué)家們能夠?qū)⑸窠?jīng)元的發(fā)射可視化。然而,在此之前一直無法實(shí)現(xiàn)對這些神經(jīng)元活動(dòng)進(jìn)行高速的大范圍3D成像。
利用激光束掃描大腦可以產(chǎn)生神經(jīng)元互動(dòng)的3D圖像,但捕捉這樣的圖片需要耗費(fèi)大量的時(shí)間,因?yàn)槊恳粋€(gè)點(diǎn)都必須單獨(dú)掃描。麻省理工學(xué)院的研究小組希望獲得相似的3D成像,但加速這一過程從而實(shí)現(xiàn)觀測神經(jīng)元的發(fā)射很困難,后者一般發(fā)生的非???,只有幾毫秒的時(shí)間。
的方法是基于一種被廣泛應(yīng)用的名為光場成像(light-field imaging)的技術(shù),通過測量進(jìn)來光線的角度從而創(chuàng)造3D圖像。研究作者、美國麻省理工學(xué)院媒體藝術(shù)與科學(xué)的副教授拉梅什·拉斯卡(Ramesh Raskar)一直都在研究這種3D成像技術(shù)。在此之前其它科研小組已經(jīng)研發(fā)了運(yùn)行光場成像的顯微鏡,而在這項(xiàng)的研究里,研究人員將這種光場顯微鏡*化并將其應(yīng)用于神經(jīng)元活動(dòng)成像。
利用這種顯微鏡,樣本釋放的光被發(fā)送經(jīng)過透鏡陣列,后者會(huì)在不同的方向折射光。樣本的每個(gè)點(diǎn)大約會(huì)產(chǎn)生400多個(gè)不同的光的點(diǎn),利用電腦算法將這些點(diǎn)重新結(jié)合便可以再現(xiàn)3D結(jié)構(gòu)。“如果樣本里有一個(gè)釋放光的分子,傳統(tǒng)顯微鏡會(huì)將它重新聚焦在單一的點(diǎn)上,但我們的透鏡陣列可以將光投射在很多點(diǎn)上,由此你可以推測出這個(gè)分子所處的三維位置。” 博伊登說道。
奧地利維也納大學(xué)的博士后羅伯特·普雷韋代爾(Robert Prevedel)建造了這個(gè)顯微鏡,而這項(xiàng)研究的研究作者、美國麻省理工學(xué)院的研究生楊奎尹(Young-Gyu Yoon)修改了電腦算法從而重建了3D圖像。
美國哈佛大學(xué)的物理學(xué)家教授艾拉文森·塞繆爾(Aravinthan Samuel)表示這種方法看起來“非常有前景”,它能夠加速對移動(dòng)活體生物進(jìn)行3D成像,從而將它們的神經(jīng)元活動(dòng)與行為相。“這項(xiàng)研究zui令人印象深刻的方面在于這是一種非常簡單的方法,”塞繆爾說道,他并未參與這項(xiàng)研究,“我可以想像很多實(shí)驗(yàn)室都可以應(yīng)用這種方法。”
活動(dòng)中的神經(jīng)元
研究人員利用這種技術(shù)實(shí)現(xiàn)了秀麗隱桿線蟲的神經(jīng)活動(dòng)成像,這是*一個(gè)整個(gè)神經(jīng)線路圖都已知的生物。這種1毫米長的蠕蟲有302個(gè)神經(jīng)元,當(dāng)它執(zhí)行自然行為時(shí),例如爬行,研究人員能夠?qū)γ總€(gè)神經(jīng)元進(jìn)行成像。他們還觀察到這種生物對感官刺激(如氣味)所產(chǎn)生的神經(jīng)反應(yīng)。
博伊登稱,光場顯微鏡的缺點(diǎn)是它的分辨率不如緩慢掃描樣本技術(shù)那么好。但目前的分辨率足夠高,可以看到單個(gè)神經(jīng)元的活動(dòng),研究人員仍在努力改進(jìn),使得顯微鏡也能用于對某些神經(jīng)元部分進(jìn)行成像,例如從神經(jīng)元主體上分支出來的長樹突。他們還希望加快計(jì)算過程,目前分析一秒鐘的成像數(shù)據(jù)需要幾分鐘時(shí)間。
研究人員還計(jì)劃將這一技術(shù)與光學(xué)遺傳學(xué)相結(jié)合,通過將光照射在表達(dá)光敏感蛋白的細(xì)胞表面,從而控制神經(jīng)元的發(fā)射。通過用光刺激神經(jīng)元,并觀察大腦中其它區(qū)域的活動(dòng),科學(xué)家可以確定哪些神經(jīng)元參與了特定活動(dòng)。這項(xiàng)研究被發(fā)表在5月18日的期刊《自然-方法》(Nature Methods)上。(顯微鏡 )
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