【檢測原理】：本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IgM 單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和*化的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的IgM 與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素 (streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中IgM 濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長測定吸光度值。
【檢驗方法】
試劑準(zhǔn)備
檢測前請將所有的試劑、樣本恢復(fù)至室溫。 如果濃縮的試劑出現(xiàn)結(jié)晶，37℃溫浴，直至結(jié)晶全部溶解。
1×洗液
吸取 20×濃縮洗液 30 ml 至 1 L 的量筒，加蒸餾水或去離子水至600 ml，輕輕混勻，避免泡 沫。 轉(zhuǎn)移至干凈瓶內(nèi)。2 - 25℃貯存，1×洗液可穩(wěn)定 30 天。
1×檢測緩沖液
吸取 10×濃縮檢測緩沖液 5 ml 至 100 ml 量筒，加蒸餾水或去離子水至 50 ml，輕輕混勻，避 免泡沫。 2 - 8℃貯存，1×檢測緩沖液可穩(wěn)定保存 30 天。
檢測抗體 稀釋前充分混勻。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本的數(shù)量，用 1×檢測緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的檢 測抗體。 注意：請在 30 分鐘內(nèi)使用稀釋后的檢測抗體。
辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素
稀釋前充分混勻。 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本的數(shù)量，用 1×檢測緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的辣根過氧化物酶標(biāo)記的 鏈霉親和素。 注意：請在 30 分鐘內(nèi)使用稀釋后的辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素。
樣本稀釋
如果樣本需要稀釋，請用試劑盒提供的 1×檢測緩沖液稀釋血清/血漿樣本，用細胞培養(yǎng)基稀釋 細胞培養(yǎng)上清。
免疫球蛋白M (IgM)標(biāo)準(zhǔn)品
用蒸餾水或去離子水重溶免疫球蛋白M (IgM)標(biāo)準(zhǔn)品，重溶體積標(biāo)注在免疫球蛋白M (IgM)標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)簽上。輕柔 地渦旋震蕩，確保充分混勻，重溶后標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為4000 pg/ml。重溶后靜置 10 - 30 分鐘。稀釋 前充分混勻。 請使用聚丙烯管進行標(biāo)準(zhǔn)品稀釋。
