Western blotting（WB蛋白）是在蛋白質(zhì)凝膠電泳和固相免疫測(cè)定基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)，是將SDS-PAGE電泳分離的蛋白質(zhì)樣本轉(zhuǎn)移到固相載體（硝酸纖維素NC膜，PVDF膜）上，以固相載體上的蛋白質(zhì)作為抗原，與合適的抗體結(jié)合，再與酶標(biāo)記的二抗結(jié)合，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定及定量的分析技術(shù)，其檢測(cè)蛋白質(zhì)的靈敏度為ng級(jí)，該技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究領(lǐng)域。

WB蛋白免疫檢測(cè)：Western blotting(WB)是在蛋白質(zhì)凝膠電泳和固相免疫測(cè)定基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)，是將SDS-PAGE電泳分離的蛋白質(zhì)樣本轉(zhuǎn)移到固相載體（硝酸纖維素NC膜，PVDF膜）上，以固相載體上的蛋白質(zhì)作為抗原，與合適的抗體結(jié)合，再與酶標(biāo)記的二抗結(jié)合，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定及定量的分析技術(shù)，其檢測(cè)蛋白質(zhì)的靈敏度為ng級(jí)，該技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究領(lǐng)域。
WB蛋白流程：
1、客戶告知實(shí)驗(yàn)分組、編號(hào)、檢測(cè)樣本類型、種屬、指標(biāo)及背景設(shè)計(jì)資料，有具體要求請(qǐng)事先說(shuō)明；
2、簽訂合同，寄送樣本和抗體，如需我方提供抗體請(qǐng)事先說(shuō)明；
3、進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，提供防偽版實(shí)驗(yàn)結(jié)果，待客戶確定后付清余款，提供原始膠片和實(shí)驗(yàn)報(bào)告；
4、利用軟件測(cè)定目的蛋白與內(nèi)參蛋白條帶的光密度值IOD，計(jì)算目的蛋白相對(duì)表達(dá)量。

客戶注意事項(xiàng)
1、抗體：事先咨詢上海基爾頓生物，明確抗體種屬以及是否有該抗體可使用，如無(wú)可由雙方協(xié)商而定，客戶自己購(gòu)買提供或我公司提供；

2、標(biāo)本收集與保存：
組織樣品  新鮮組織放入液氮或-70度保存，組織不少于100mg（約綠豆大?。?br />培養(yǎng)細(xì)胞  通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2000000個(gè)細(xì)胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，混勻后保存于冰箱（-70℃，避免反復(fù)凍融）；
血液細(xì)胞標(biāo)本  以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，保存（-70℃可*保存，避免反復(fù)凍融）
血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本  離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存（以上4℃可保存15-20天，-70℃可*保存，避免反復(fù)凍融）
3、樣本運(yùn)輸：可選以下任何的一種方式寄送標(biāo)本
組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后加冰袋運(yùn)輸；
細(xì)胞樣本也可以直接快件寄送培養(yǎng)瓶（密封保證不污染，培養(yǎng)液不漏出，細(xì)胞不要長(zhǎng)得太滿，50%左右，灌滿培養(yǎng)液）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（密封保證液體不漏出，視路途遠(yuǎn)近2-3天可到達(dá)）。

目前，上海劍鈍生物科技有限公司，主營(yíng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、SCI論文服務(wù)、動(dòng)物模型構(gòu)建、細(xì)胞株、elisa試劑盒等，歡迎廣大科研愛好者前來(lái)咨詢選購(gòu)！