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western blot實驗檢測

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western blot實驗:一般步驟是將經(jīng)過SDS-PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。

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western blot實驗服務(wù)簡介Western blot技術(shù)的一般步驟是將經(jīng)過SDS-PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。由于Western blot檢測技術(shù)結(jié)合了凝膠電泳的高分辨率和固相免疫測定的特異敏感等多種特點,因此可檢測到1-5 ng (zui低可到10-100 pg)中等大小的靶蛋白。同時,Western blot技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測蛋白水平的表達。

western blot實驗應(yīng)用范圍1、半定量或定性檢測細胞或組織中目標蛋白的表達情況;2、從蛋白質(zhì)混合物中檢出目標蛋白質(zhì);3、蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后續(xù)分析,并結(jié)合組分分離技術(shù),檢測目標蛋白的定位情況,為免疫熒光實驗的補充;4、在后基因組時代,將與質(zhì)譜和蛋白質(zhì)芯片等其他技術(shù)一起相互配合,發(fā)揮更重要的作用。

western blot實驗服務(wù)流程:

 Western Blot實驗服務(wù)是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。Western Blot的操作步驟主要包括:蛋白樣品收集,電泳,轉(zhuǎn)膜,封閉,一抗孵育,二抗孵育,底物顯色等過程。


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