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微譜檢測(cè)有獎(jiǎng)?wù){(diào)研
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島津?qū)W堂:一文讀懂阿膠定量“新標(biāo)準(zhǔn)”

2020-04-08 14:10:37來源:島津關(guān)鍵詞:島津閱讀量:2526
我要評(píng)論

  【儀器網(wǎng) 島津導(dǎo)語:古語云“阿膠一碗,芝麻一盞,白米紅餡蜜餞。粉腮似羞,杏花春雨帶笑看。潤(rùn)了青春,保了天年,有了本錢”。阿膠能補(bǔ)血滋陰、潤(rùn)燥止血,自古為滋補(bǔ)上品。
 
 
  阿膠系驢皮經(jīng)煎煮濃縮成的固體膠。近年來,隨著驢皮貨源緊缺,市面上存在不法商販弄虛作假,以次充好,以牛皮、馬皮等下腳料冒充驢皮制作假冒偽劣阿膠的行徑,嚴(yán)重?cái)_亂了阿膠市場(chǎng)。其他獸畜皮熬膠,也有補(bǔ)血止血的功能,但阿膠偽品的蛋白質(zhì)成分及其含量和阿膠真品存在明顯不同,與驢皮膠使用效果相差甚遠(yuǎn)。因此,掌握阿膠的真?zhèn)舞b別方法至關(guān)重要。
 
  為了進(jìn)一步規(guī)范阿膠產(chǎn)業(yè)發(fā)展,提升阿膠品質(zhì)保障能力,國(guó)家藥典委在2019年發(fā)布關(guān)于“關(guān)于阿膠、海龍、海馬等國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)修訂草案的公示”和“關(guān)于阿膠國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)修訂草案的公示(第二次)”兩項(xiàng)公示稿,分別對(duì)阿膠【含量測(cè)定】和阿膠【鑒別】項(xiàng)下內(nèi)容進(jìn)行了修訂。其中阿膠【含量測(cè)定】項(xiàng)修訂幅度大,新增了“特征多肽”含量要求:
 
  驢源多肽A1特征離子對(duì):m/z469.25>712.30和m/z z469.25>783.40,
 
  驢源多肽A2特征離子對(duì):m/z618.35> 779.40和m/z618.35> 850.40,
 
  按干燥品計(jì)算,“含特征多肽以驢源多肽A1(C41H68N12O13)和驢源多肽A2(C51H82N18O18)的總量計(jì)應(yīng)不得少于0.17%”。
 
  此外,在2012年藥典委頒布了《阿膠中牛皮源質(zhì)量的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》。2015版《中國(guó)藥典》中,明確規(guī)定使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法用于阿膠、龜甲膠、鹿角膠的鑒別。近,國(guó)家藥監(jiān)局還頒布了《阿膠中豬皮源的補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》,在阿膠產(chǎn)品中應(yīng)不得檢出豬皮源(新阿膠)成分。
 
  島津參考以上標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)報(bào)道,使用胰蛋白酶對(duì)阿膠、牛皮膠和豬皮膠等不同來源的明膠類物質(zhì)進(jìn)行酶切處理,通過島津LCMS-8045液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(圖1)對(duì)特征多肽進(jìn)行測(cè)定,從而實(shí)現(xiàn)阿膠與雜皮膠的鑒別與阿膠的定量。
 
圖 1 島津 LCMS-8045液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀
 
  主要方法參數(shù)
 
  色譜柱:
 
  Shim-pack GIST (2.1 mm I.D.×100 mm L., 2.0 μm)
 
  MRM參數(shù):見表1
 
  表1 MRM優(yōu)化參數(shù)
 
對(duì)照藥材分析
 
  采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法,一次進(jìn)樣,同時(shí)分析8種特征多肽,實(shí)現(xiàn)阿膠藥材的鑒別與定量。分析結(jié)果表明,阿膠、驢源多肽A1、驢源多肽A2、黃明膠、鹿角膠、龜甲膠、新阿膠、馬皮源多肽信噪比均大于10:1,完全滿足檢測(cè)要求。如下圖2(左右滑動(dòng)查看全部?jī)?nèi)容)
 
圖2 阿膠等8種特征肽定性色譜圖
 
  樣品測(cè)定
 
  對(duì)阿膠樣品進(jìn)行測(cè)定,黃明膠、鹿角膠、龜甲膠、新阿膠、馬皮源通道均未檢出;阿膠、驢源多肽A1、驢源多肽A2分離良好,峰形對(duì)稱,且信噪比均大于10:1。如下圖3(左右滑動(dòng)查看全部?jī)?nèi)容)
 
圖3   阿膠定性定量肽段測(cè)量
 
  總結(jié)
 
  阿膠作為滋補(bǔ)佳品,消費(fèi)者平時(shí)關(guān)注更多的是阿膠的功效。其實(shí),無數(shù)“實(shí)驗(yàn)猿”為了保證阿膠的真實(shí)與有效,默默地完成了大量阿膠藥材真?zhèn)舞b別與含量測(cè)定的工作。有了本文的方法,“實(shí)驗(yàn)猿”可以一針進(jìn)樣鑒別多種肽段,節(jié)省時(shí)間。除此之外,本方法加入了定量肽段,可以實(shí)現(xiàn)定性定量同時(shí)分析。
 
  “暗服阿膠不肯道,卻說生來為君容”。更多關(guān)于阿膠的文章,參閱島津推出《膠類藥材定性鑒別解決方案》。
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