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蘇州市萊頓科學儀器有限公司

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液相色譜法—檢測黃曲霉毒素殘留

點擊次數(shù):1199 發(fā)布時間:2014-11-19

蘇州市萊頓科學儀器有限公司

         

       

 

液相色譜法—檢測黃曲霉毒素殘留

 

1.原理

樣品經(jīng)有機溶劑提取、凈化和衍生化反應后,濃縮液注人HPLC儀,經(jīng)色譜柱分離,分離出的組分依次進人熒光檢測器發(fā)射波長360 nm、激發(fā)波長245 nm),產(chǎn)生相應的電信號,由記錄儀記錄響應信號,經(jīng)微處理機自動計算及打印出樣品中AFT含量(ng)。
2.儀器
   
HPI.C具熒光檢測器。
3.試劑
   
硅鎂型吸附劑:100-1200目,3502 h,冷后裝入密閉容器中,用前加水15%減活,平衡48h??烧r續(xù)傅用7天。
   
流動相:甲醇+0.01mol·L-1 KH2P04(1+1)溶液配制后,經(jīng)0.45 um濾膜抽濾并脫氣。
   
層析柱,底層和上層為2.cIn厚的無水Na2S04,中層為0.4 g硅鎂吸附劑,均以氯仿濕潤。
   
其他試劑參照薄層層析法。
4.儀器工作條件
   
具熒光檢測器激發(fā)波長245 nm、發(fā)射波長360 nm)。
   
GAIN16SpanMax。
   
柱:C18 10um(Radial pak cartridges)。
   
流動相:甲醇+0.01toolL KH2P04(1+1)
   
流速:1.3 mLmin。
   
進樣量:10 uL。
5.檢測步驟
   
樣品提取與凈化:準確稱取樣品10 g于具塞錐形瓶中,加50 mI。氯仿,振蕩30 min,過濾于層析柱中,用氯仿+正己烷(1+1)8 mI,,氯仿+甲醇(9+1)10 mL,淋洗除雜質(zhì),zui后用20 mL丙酮+(99+1)洗脫黃曲霉毒素,收集于燒杯中,在50水浴中揮干溶劑,再用氯仿分次將殘渣洗人2 mL具塞試管中,并于50水浴中通Nz吹干。
   
衍生化反應:向具塞試管中加200uI。正己烷,50uL三fu乙shuan,將蓋蓋緊,充分混勻1 min,靜置30 rain后用Nz吹干。加100uL流動相,充分混勻,待檢。
   
標準液的處理:取適量標準溶液,按樣品處理方法萃取、凈化和衍生化反應,定容,使AFTBl、AFTMlzui后濃度均為0.1 ng·uL-1。
   
AFT保留時間及標準色譜圖:保留時間(min) AFTM1 3.36,AFTG1 4.72,AFTB1 16.00FT G2 10.12,AFTB2 14.40。
6.說明
   
本法應在1天內(nèi)完成檢測,否則結果偏低。
   
層析柱中硅鎂吸附劑應先用氯仿調(diào)為糊狀加入。

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