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扇貝毒素-2 CRM-PTX2-b標(biāo)準(zhǔn)品材料收集

閱讀:198      發(fā)布時(shí)間:2022-12-21
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扇貝毒素-2CRM-PTX2-b標(biāo)準(zhǔn)品是一種經(jīng)認(rèn)證的校正液,用于分析方法的開(kāi)發(fā)和PTX 2的準(zhǔn)確定量。CRM-PTX2-b的濃度使其適合于制備液相色譜(LC)和液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)儀器校準(zhǔn)的稀釋液系列,也適用于貝類(lèi)對(duì)照樣品的回收實(shí)驗(yàn)。


扇貝毒素-2CRM-PTX2-b標(biāo)準(zhǔn)品是新西蘭Cawthron研究所從浮游植物水華中分離到的一種植物。2001年2月初,這些浮游植物在離新西蘭布勒灣海岸3-4公里的地方被凈化,并按照前面的描述[2]進(jìn)行了一系列色譜步驟的凈化。用純化的PTX 2在CDs0H(~4mm)中溶解制得原液。然后用定量NMR[5]測(cè)定了該原液中PTX 2的濃度,然后將PTX 2原液準(zhǔn)確地稀釋在經(jīng)氣處理的高純甲醇中,制成終容為2 L的PTX 2原液。該溶液與Teflon攪拌棒和磁混合器混合,在氬氣條件下冷卻于冰浴中。阿利古特被分配到琥珀玻璃安瓿和火焰密封在Argonle下,然后被標(biāo)記,包裝,并立即轉(zhuǎn)移到長(zhǎng)期儲(chǔ)存在-80℃。每個(gè)安瓿含有大約0.5毫升的溶液。


扇貝毒素, 特別是 扇貝毒素-2, 主要由海洋甲藻中的 鰭藻屬 (Dinophysis spp.) 產(chǎn) 生 , 如倒卵形鰭藻 (Dinophysis fortii)、漸尖鰭藻(D. acuminata)、尖銳鰭 藻(D. acuta)、具尾鰭藻(D. caudata)、勇士鰭藻(D.  miles)等 (Suzuki et al, 2009; Reguera et al, 2012;  Nielsen et al, 2013; Tong et al, 2015)。但由于鰭藻的混 合營(yíng)養(yǎng)特性, 即鰭藻的生長(zhǎng)和繁殖需要三級(jí)食物鏈 [ 鰭藻—紅色中縊蟲(chóng) (Mesodinium rubrum) —隱藻 (Geminigera cryophila)]來(lái)完成(Park et al, 2006), 這 為從大規(guī)模培養(yǎng)的鰭藻中提取 扇貝毒素-2帶來(lái)一定的困 難。因此, 國(guó)際上一般是通過(guò)大量收集濃縮野外海水 樣品或染毒貝類(lèi)來(lái)獲取 PTX2 標(biāo)準(zhǔn)品的制備原料。這樣 的工藝不僅制備過(guò)程復(fù)雜且工序繁瑣, 更重要的是原 料來(lái)源極不穩(wěn)定, 無(wú)法滿足常規(guī)監(jiān)管及應(yīng)急需要。

因 此, 有研究以上述三級(jí)食物鏈為實(shí)驗(yàn)手段 (Gao et al, 2017), 成功大規(guī)模培養(yǎng)了來(lái)自中國(guó)大連海 域的漸尖鰭藻(DAYS01-E6 株), 為制備 扇貝毒素-2提供了 充足的原料。并在此基礎(chǔ)上, 重點(diǎn)研究了在純種鰭藻 細(xì)胞中提取、分離、HPLC 純化扇貝毒素-2的標(biāo)準(zhǔn)化方法,  同時(shí)采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)進(jìn) 行定量檢測(cè), 為建立高效快速的 PTX2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制 方法奠定基礎(chǔ)。


東莞市百順生物科技有限公司是加拿大國(guó)家研究委員會(huì)NRC的代理商,專(zhuān)業(yè)代理扇貝毒素-2CRM-PTX2-b標(biāo)準(zhǔn)品。



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